د nature.com د لیدنې لپاره مننه. هغه براوزر نسخه چې تاسو یې کاروئ د CSS محدود ملاتړ لري. د غوره تجربې لپاره، موږ سپارښتنه کوو چې د براوزر وروستۍ نسخه وکاروئ (یا په انټرنیټ اکسپلورر کې د مطابقت حالت بند کړئ). برسیره پردې، د دوامداره ملاتړ ډاډ ترلاسه کولو لپاره، دا سایټ به سټایلونه یا جاواسکریپټ شامل نه کړي.
میلامین د خوړو یو پیژندل شوی ککړونکی دی چې ممکن په ناڅاپي او قصدي ډول د خوړو په ځینو کټګوریو کې شتون ولري. د دې څیړنې هدف د ماشومانو په فورمول او د شیدو پوډر کې د میلامین کشف او اندازه کول تایید کول وو. د ایران له بیلابیلو سیمو څخه د ماشومانو فورمول او د شیدو پوډر په ګډون په ټولیزه توګه 40 سوداګریز شتون لرونکي خواړه نمونې تحلیل شوې. د نمونو نږدې میلامین مینځپانګه د لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي-الټرا وایلیټ (HPLC-UV) سیسټم په کارولو سره ټاکل شوې وه. د 0.1-1.2 μg mL−1 په حد کې د میلامین کشف لپاره د کیلیبریشن منحنی (R2 = 0.9925) جوړ شوی و. د مقدار کولو او کشف محدودیتونه په ترتیب سره 1 μg mL−1 او 3 μg mL−1 وو. میلامین د ماشومانو په فورمول او د شیدو پوډر کې ازمول شوی و او پایلو ښودلې چې د ماشومانو په فورمول او د شیدو پوډر نمونو کې د میلامین کچه په ترتیب سره 0.001–0.095 mg kg−1 او 0.001–0.004 mg kg−1 وه. دا ارزښتونه د اروپايي اتحادیې د قانون او د کوډیکس الیمینټاریس سره سم دي. دا مهمه ده چې په یاد ولرئ چې د دې شیدو محصولاتو مصرف چې د میلامین کم مقدار لري د مصرف کونکي روغتیا ته د پام وړ خطر نه رامینځته کوي. دا د خطر ارزونې پایلو لخوا هم ملاتړ کیږي.
میلامین یو عضوي مرکب دی چې د مالیکولي فورمول C3H6N6 لري، چې د سیانامایډ څخه اخیستل شوی. دا په اوبو کې خورا ټیټ محلول لري او نږدې 66٪ نایتروجن لري. میلامین یو پراخه کارول شوی صنعتي مرکب دی چې د پلاستیک، سرې، او د خوړو پروسس کولو تجهیزاتو (د خوړو بسته بندۍ او پخلنځي سامانونو په شمول) په تولید کې د قانوني استعمالونو پراخه لړۍ لري. میلامین د ناروغیو درملنې لپاره د درملو لیږدونکي په توګه هم کارول کیږي. په میلامین کې د نایتروجن لوړه تناسب کولی شي د مرکب ناوړه ګټه اخیستنې او د خوړو اجزاو ته د پروټین مالیکولونو ملکیتونو ورکولو لامل شي 3,4. له همدې امله، د لبنیاتو محصولاتو په ګډون د خوړو محصولاتو ته د میلامین اضافه کول د نایتروجن مینځپانګه زیاتوي. په دې توګه، دا په غلطۍ سره پایله شوه چې د شیدو پروټین مینځپانګه د هغې په پرتله لوړه وه.
د هر ګرام میلامین اضافه کولو لپاره، د خوړو د پروټین مینځپانګه به 0.4٪ زیاته شي. په هرصورت، میلامین په اوبو کې خورا محلول کیږي او کولی شي ډیر جدي زیان ورسوي. د شیدو په څیر مایع محصولاتو کې د 1.3 ګرامه میلامین اضافه کول کولی شي د شیدو پروټین مینځپانګه 30٪ 5,6 زیاته کړي. که څه هم میلامین د څارویو او حتی انسانانو خواړو کې د پروټین مینځپانګې زیاتولو لپاره اضافه کیږي 7، د کوډیکس الیمینټیریس کمیسیون (CAC) او ملي چارواکو میلامین د خواړو اضافه کونکي په توګه نه دی تصویب کړی او دا یې د خطرناک په توګه لیست کړی که چیرې تیر شي، تنفس شي، یا د پوټکي له لارې جذب شي. په 2012 کې، د نړیوال روغتیا سازمان (WHO) د سرطان په اړه د څیړنې نړیوالې ادارې میلامین د 2B ټولګي کارسنجن په توګه لیست کړ ځکه چې دا ممکن د انسان روغتیا ته زیان ورسوي 8. د میلامین سره اوږدمهاله تماس ممکن د سرطان یا پښتورګو زیان لامل شي 2. په خواړو کې میلامین کولی شي د سیانوریک اسید سره پیچلي شي ترڅو د اوبو نه حل کیدونکي ژیړ کرسټالونه رامینځته کړي چې کولی شي د پښتورګو او مثانې نسج ته زیان ورسوي، او همدارنګه د ادرار د لارې سرطان او د وزن کمیدل 9,10. دا کولی شي د خوړو د زهري کېدو او په لوړه غلظت کې د مړینې لامل شي، په ځانګړې توګه په ماشومانو او کوچنیو ماشومانو کې. ۱۱ د روغتیا نړیوال سازمان (WHO) د CAC لارښوونو پراساس د انسانانو لپاره د میلامین د زغم وړ ورځنی مصرف (TDI) هم په ورځ کې ۰.۲ ملی ګرامه/کیلو ګرامه د بدن وزن ټاکلی دی. ۱۲ د متحده ایالاتو د خوړو او درملو ادارې (US FDA) د میلامین لپاره د پاتې شونو اعظمي کچه د ماشومانو په فورمول کې ۱ ملی ګرامه/کیلو ګرامه او په نورو خواړو کې ۲.۵ ملی ګرامه/کیلو ګرامه ټاکلې ده. ۲،۷ د ۲۰۰۸ کال په سپتمبر کې، راپور ورکړل شو چې د ماشومانو د فورمول څو کورنیو جوړونکو د شیدو پوډر ته میلامین اضافه کړی و ترڅو د دوی د محصولاتو پروټین مینځپانګه زیاته کړي، چې په پایله کې یې د شیدو پوډر مسمومیت رامینځته شو او په ټول هیواد کې د میلامین مسمومیت پیښې رامینځته شوې چې له ۲۹۴،۰۰۰ څخه ډیر ماشومان یې ناروغه کړل او له ۵۰،۰۰۰ څخه ډیر یې په روغتون کې بستر کړل. ۱۳
د ښاري ژوند د ستونزو، د مور یا ماشوم د ناروغۍ په څیر د مختلفو عواملو له امله د مور شیدې ورکول تل ممکن نه وي، کوم چې د ماشومانو د تغذیه کولو لپاره د ماشوم فارمول کارولو ته لار هواروي. په پایله کې، فابریکې رامینځته شوي ترڅو د ماشوم فارمول تولید کړي چې د مور شیدو ته د امکان تر حده نږدې وي14. په بازار کې پلورل شوي د ماشوم فارمول معمولا د غوا له شیدو څخه جوړ شوی او معمولا د غوړو، پروټینونو، کاربوهایډریټونو، ویټامینونو، منرالونو او نورو مرکباتو ځانګړي مخلوط سره جوړ شوی. د مور شیدو ته د نږدې کیدو لپاره، د فورمول پروټین او غوړ مینځپانګه توپیر لري، او د شیدو ډول پورې اړه لري، دوی د ویټامینونو او منرالونو لکه اوسپنې سره قوي کیږي15. څرنګه چې ماشومان یو حساس ګروپ دی او د مسمومیت خطر شتون لري، د شیدو پوډر مصرف خوندیتوب روغتیا لپاره خورا مهم دی. د چینایي ماشومانو ترمنځ د میلامین مسمومیت قضیې وروسته، د نړۍ شاوخوا هیوادونو دې مسلې ته نږدې پاملرنه کړې، او د دې سیمې حساسیت هم ډیر شوی. له همدې امله، دا په ځانګړي ډول مهم دی چې د ماشومانو د روغتیا ساتنې لپاره د ماشوم فارمول تولید کنټرول پیاوړی شي. په خوړو کې د میلامین کشفولو لپاره مختلف میتودونه شتون لري، پشمول د لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي (HPLC)، الیکټروفوریسس، حسي میتود، سپیکٹروفوټومیټري او د انټيجن-انټي باډي انزایم سره تړلي امیونوسوربینټ ارزونه16. په 2007 کې، د متحده ایالاتو د خوړو او درملو ادارې (FDA) په خوړو کې د میلامین او سیانوریک اسید د ټاکلو لپاره د HPLC میتود رامینځته او خپور کړ، کوم چې د میلامین مینځپانګې ټاکلو لپاره ترټولو مؤثر میتود دی17.
د نوي انفراریډ سپیکٹروسکوپي تخنیک په کارولو سره اندازه شوي د ماشومانو په فورمول کې د میلامین غلظت د 0.33 څخه تر 0.96 ملی ګرامه په هر کیلوګرام (mg kg-1) پورې و. 18 په سریلانکا کې یوې څیړنې وموندله چې د بشپړ شیدو پوډر کې د میلامین کچه د 0.39 څخه تر 0.84 ملی ګرامه kg-1 پورې وه. سربیره پردې، وارد شوي د ماشومانو فورمول نمونو کې د میلامین لوړه کچه په ترتیب سره 0.96 او 0.94 ملی ګرامه / کیلوګرامه وه. دا کچه د تنظیمي حد څخه ښکته ده (1 ملی ګرامه / کیلوګرام)، مګر د مصرف کونکي خوندیتوب لپاره د څارنې پروګرام ته اړتیا ده. 19
ګڼو څېړنو د ایراني ماشومانو په فورمولونو کې د میلامین کچه معاینه کړې ده. شاوخوا ۶۵٪ نمونو کې میلامین شامل وو، چې اوسط یې ۰.۷۳ ملی ګرامه/کیلوګرام او اعظمي حد یې ۳.۶۳ ملی ګرامه/کیلوګرام دی. یوې بلې څېړنې راپور ورکړی چې د ماشومانو په فورمول کې د میلامین کچه له ۰.۳۵ څخه تر ۳.۴۰ μg/کیلوګرام پورې وه، چې اوسط یې ۱.۳۸ μg/کیلوګرام دی. په ټولیز ډول، د ایراني ماشومانو په فورمولونو کې د میلامین شتون او کچه په مختلفو مطالعاتو کې ارزول شوې ده، ځینې نمونې چې میلامین لري د تنظیم کونکو چارواکو لخوا ټاکل شوي اعظمي حد (۲.۵ ملی ګرامه/کیلوګرام/خواړه) څخه ډیرې دي.
د خوړو په صنعت کې د شیدو پوډرو لوی مستقیم او غیر مستقیم مصرف او د ماشومانو په تغذیه کې د ماشومانو فورمول ځانګړي اهمیت په پام کې نیولو سره، دا څیړنه د شیدو پوډرو او ماشومانو فورمول کې د میلامین د کشف میتود تاییدولو لپاره وه. په حقیقت کې، د دې څیړنې لومړۍ موخه د لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي (HPLC) او الټرا وایلیټ (UV) کشف په کارولو سره د ماشومانو په فورمول او شیدو پوډرو کې د میلامین ملاوت کشفولو لپاره د چټک، ساده او دقیق مقداري میتود رامینځته کول وو؛ دوهم، د دې څیړنې موخه د ایران په بازار کې پلورل شوي د ماشومانو په فورمول او شیدو پوډرو کې د میلامین مینځپانګه ټاکل وو.
د میلامین تحلیل لپاره کارول شوي وسایل د خوړو د تولید موقعیت پورې اړه لري. د شیدو او ماشومانو فورمول کې د میلامین پاتې شونو اندازه کولو لپاره د HPLC-UV تحلیل یوه حساسه او باوري طریقه کارول شوې وه. د لبنیاتو محصولات مختلف پروټینونه او غوړ لري چې ممکن د میلامین اندازه کولو کې مداخله وکړي. له همدې امله، لکه څنګه چې د سن او نورو لخوا یادونه شوې. 22، د وسایلو تحلیل دمخه د پاکولو مناسب او مؤثره ستراتیژي اړینه ده. پدې څیړنه کې، موږ د ضایع کیدو وړ سرنج فلټرونه کارولي. پدې څیړنه کې، موږ د C18 کالم کارولی ترڅو د ماشومانو فورمول او د شیدو پوډر کې میلامین جلا کړي. شکل 1 د میلامین کشف لپاره کروماتګرام ښیې. سربیره پردې، د 0.1-1.2 ملی ګرامه / کیلوګرام میلامین لرونکي نمونو بیا رغونه له 95٪ څخه تر 109٪ پورې وه، د ریګریشن معادله y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925) وه، او د نسبي معیاري انحراف (RSD) ارزښتونه له 0.8 څخه تر 2٪ پورې وو. شته معلومات ښیي چې دا طریقه د مطالعې شوي غلظت حد کې د اعتبار وړ ده (جدول ۱). د میلامین د کشف کولو وسیله حد (LOD) او د مقدار ټاکلو حد (LOQ) په ترتیب سره 1 μg mL−1 او 3 μg mL−1 وو. سربیره پردې، د میلامین UV سپیکٹرم په 242 nm کې د جذب بانډ ښودلی. د کشف کولو طریقه حساسه، باوري او دقیقه ده. دا طریقه د میلامین کچې د معمول ټاکلو لپاره کارول کیدی شي.
ورته پایلې د ډیری لیکوالانو لخوا خپرې شوې دي. د لبنیاتو محصولاتو کې د میلامین تحلیل لپاره د لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي-فوټوډیوډ صف (HPLC) میتود رامینځته شوی. د مقدار کولو ټیټ حدونه د شیدو پوډر لپاره 340 μg kg−1 او د 240 nm په اندازه د ماشوم فورمول لپاره 280 μg kg−1 وو. فیلازي او نور. (2012) راپور ورکړ چې د HPLC لخوا د ماشوم فورمول کې میلامین نه دی کشف شوی. په هرصورت، د شیدو پوډر نمونو 8٪ د 0.505–0.86 mg/kg په کچه میلامین لري. ټټلمیټ او نور.23 ورته مطالعه ترسره کړه او د لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي-ماس سپیکٹرومیټري/MS (HPLC-MS/MS) لخوا د ماشوم فورمول (نمونې شمیره: 72) د میلامین مینځپانګه نږدې 0.0431–0.346 mg kg−1 وټاکله. د وینکټاسامي او نورو لخوا ترسره شوې یوه څیړنه کې. (۲۰۱۰)، د شنه کیمیا طریقه (پرته له اسټونایټریل) او د لوړ فعالیت لرونکي مایع کروماتګرافي (RP-HPLC) د ماشوم فورمول او شیدو کې د میلامین اټکل کولو لپاره کارول شوې وه. د نمونې غلظت حد له ۱.۰ څخه تر ۸۰ g/mL پورې و او ځواب خطي (r > ۰.۹۹۹) و. دې میتود د ۵-۴۰ g/mL د غلظت حد په پرتله د ۹۷.۲-۱۰۱.۲ بیا رغونه ښودلې او د تکثیر وړتیا یې له ۱.۰٪ څخه کمه وه. سربیره پردې، لیدل شوي LOD او LOQ په ترتیب سره ۰.۱ g mL−۱ او ۰.۲ g mL−۱۲۴ وو. لوټر او نور. (۲۰۱۱) د HPLC-UV په کارولو سره د غوا په شیدو او شیدو پر بنسټ د ماشوم فورمول کې د میلامین ککړتیا معلومه کړه. د میلامین غلظت < ۰.۲ څخه تر ۲.۵۲ mg kg−۱ پورې و. د HPLC-UV میتود خطي متحرک حد د غوا د شیدو لپاره 0.05 څخه تر 2.5 ملی ګرامه kg−1 پورې و، د ماشوم فورمول لپاره 0.13 څخه تر 6.25 ملی ګرامه kg−1 پورې د پروټین ډله ایز کسر <15٪ سره، او د ماشوم فورمول لپاره 0.25 څخه تر 12.5 ملی ګرامه kg−1 پورې د پروټین ډله ایز کسر 15٪ سره. د LOD (او LOQ) پایلې د غوا د شیدو لپاره 0.03 ملی ګرامه kg−1 (0.09 ملی ګرامه kg−1)، د ماشوم فورمول لپاره 0.06 ملی ګرامه kg−1 (0.18 ملی ګرامه kg−1) <15٪ پروټین، او د ماشوم فورمول 15٪ پروټین لپاره 0.12 ملی ګرامه kg−1 (0.36 ملی ګرامه kg−1) وې، د LOD او LOQ لپاره په ترتیب سره د 3 او 1025 سیګنال-او-شور تناسب سره. Diebes et al. (۲۰۱۲) د HPLC/DMD په کارولو سره د ماشومانو په فورمول او د شیدو پوډر نمونو کې د میلامین کچه وڅیړله. د ماشومانو په فورمول کې، ترټولو ټیټه او لوړه کچه په ترتیب سره ۹.۴۹ ملی ګرامه kg−۱ او ۲۵۸ ملی ګرامه kg−۱ وه. د کشف حد (LOD) ۰.۰۵ ملی ګرامه kg−۱ وه.
جاوید او نورو راپور ورکړ چې د ماشومانو په فورمول کې د میلامین پاتې شوني د فوریر ټرانسفارم انفراریډ سپیکٹروسکوپي (FT-MIR) لخوا د 0.002–2 mg kg−1 په حد کې وو (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1). Rezai او نورو 27 د میلامین اټکل کولو لپاره د HPLC-DDA (λ = 220 nm) میتود وړاندیز وکړ او د شیدو پوډر لپاره یې د 0.08 μg mL−1 LOQ ترلاسه کړ، کوم چې پدې څیړنه کې ترلاسه شوي کچې څخه ټیټ و. سن او نورو د جامد پړاو استخراج (SPE) لخوا په مایع شیدو کې د میلامین کشف کولو لپاره RP-HPLC-DAD رامینځته کړ. دوی په ترتیب سره د 18 او 60 μg kg−128 LOD او LOQ ترلاسه کړ، کوم چې د اوسني مطالعې څخه ډیر حساس دی. Montesano او نورو. د پروټین سپلیمنټونو کې د میلامین مینځپانګې ارزونې لپاره د HPLC-DMD میتود اغیزمنتوب تایید کړ چې د 0.05-3 ملی ګرامه / کیلو ګرامه د اندازې حد سره، کوم چې پدې څیړنه کې کارول شوي میتود څخه لږ حساس و29.
بې له شکه، تحلیلي لابراتوارونه په مختلفو نمونو کې د ککړونکو موادو د څارنې له لارې د چاپیریال ساتنې کې مهم رول لوبوي. په هرصورت، د تحلیل په جریان کې د ډیرو ریجنټونو او محلولونو کارول ممکن د خطرناکو پاتې شونو د رامینځته کیدو لامل شي. له همدې امله، شنه تحلیلي کیمیا (GAC) په 2000 کې رامینځته شوه ترڅو د آپریټرانو او چاپیریال باندې د تحلیلي پروسیجرونو منفي اغیزې کمې یا له منځه یوسي26. د میلامین د کشف دودیز میتودونه پشمول د کروماتګرافي، الیکټروفوریسس، کیپلیري الیکټروفوریسس، او انزایم سره تړلي امیونوسوربینټ ازموینې (ELISA) د میلامین پیژندلو لپاره کارول شوي. په هرصورت، د ډیری کشف میتودونو په مینځ کې، الیکټرو کیمیکل سینسرونه د دوی د غوره حساسیت، انتخاب، چټک تحلیل وخت، او د کاروونکي دوستانه ځانګړتیاو له امله ډیر پام ځانته اړولی دی30,31. شنه نانو ټیکنالوژي د نانو موادو ترکیب لپاره بیولوژیکي لارې کاروي، کوم چې کولی شي د خطرناکو ضایعاتو او انرژۍ مصرف کم کړي، په دې توګه د دوامداره کړنو پلي کول هڅوي. نانو کمپوزیتونه، د مثال په توګه، د چاپیریال دوستانه موادو څخه جوړ شوي، په بایوسینسرونو کې د میلامین په څیر موادو کشف کولو لپاره کارول کیدی شي32,33,34.
څیړنه ښیي چې د جامد پړاو مایکرو استخراج (SPME) د دودیزو استخراج میتودونو په پرتله د لوړې انرژۍ موثریت او پایښت له امله په مؤثره توګه کارول کیږي. د SPME چاپیریال دوستانه او د انرژۍ موثریت دا د تحلیلي کیمیا کې د دودیزو استخراج میتودونو لپاره یو غوره بدیل ګرځوي او د نمونې چمتو کولو لپاره یو ډیر دوامداره او مؤثر میتود چمتو کوي.
په ۲۰۱۳ کال کې، وو او نورو یو ډیر حساس او انتخابي سطحي پلازمون ریزونانس (مینی-SPR) بایوسینسر رامینځته کړ چې د میلامین او انټي میلامین انټي باډیز ترمنځ د یوځای کولو څخه کار اخلي ترڅو د امیونوسای په کارولو سره د ماشومانو په فورمول کې میلامین په چټکۍ سره کشف کړي. د SPR بایوسینسر د امیونوسای سره یوځای شوی (د میلامین-کنجوګیټډ غواګانو سیرم البومین کارول) یو اسانه کارول کیدونکی او ټیټ لګښت لرونکی ټیکنالوژي ده چې د کشف حد یوازې 0.02 μg mL-136 دی.
ناصري او عباسیان د لوړ ظرفیت لرونکي پورټ ایبل سینسر څخه د ګرافین آکسایډ-چیټوسان مرکباتو (GOCS) سره په ګډه په سوداګریزو نمونو کې د میلامین کشف کولو لپاره کار واخیست 37. دې میتود خورا لوړ انتخاب، دقت او غبرګون وښود. د GOCS سینسر د پام وړ حساسیت (239.1 μM−1)، د 0.01 څخه تر 200 μM پورې خطي حد، د 1.73 × 104 د تړاو ثابت، او تر 10 nM پورې LOD وښود. سربیره پردې، د چندر شیکر او نورو لخوا په 2024 کې ترسره شوې مطالعې یو چاپیریال دوستانه او ارزانه طریقه غوره کړه. دوی د پاپایې د پوستکي استخراج د کمولو اجنټ په توګه د زنک آکسایډ نانو ذرات (ZnO-NPs) په چاپیریال دوستانه طریقه کې ترکیب کولو لپاره کارولی. وروسته، د ماشومانو په فورمول کې د میلامین د ټاکلو لپاره یو ځانګړی مایکرو-رامان سپیکٹروسکوپي تخنیک رامینځته شو. د کرنیزو ضایعاتو څخه اخیستل شوي ZnO-NPs د ارزښتناکه تشخیصي وسیلې او د میلامین 38 څارنې او کشف کولو لپاره د باور وړ، ټیټ لګښت ټیکنالوژۍ په توګه وړتیا ښودلې ده.
علیزاده او نورو (۲۰۲۴) د شیدو په پوډر کې د میلامین د ټاکلو لپاره د فلزي-عضوي چوکاټ (MOF) فلوروسینس پلیټ فارم څخه کار واخیست. د سینسر خطي حد او ټیټ کشف حد، چې د 3σ/S په کارولو سره ټاکل شوی، په ترتیب سره له 40 څخه تر 396.45 nM (د 25 μg kg−1 څخه تر 0.25 mg kg−1 سره مساوي) او 40 nM (د 25 μg kg−1 سره مساوي) وو. دا حد د ماشومانو په فورمول (1 mg kg−1) او نورو خواړو/خواړو نمونو (2.5 mg kg−1) کې د میلامین د پیژندلو لپاره ټاکل شوي اعظمي پاتې شونو کچې (MRLs) څخه ډیر ټیټ دی. د فلوروسینټ سینسر (terbium (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) د شیدو په پوډر کې د میلامین په کشفولو کې د HPLC39 په پرتله لوړ دقت او ډیر دقیق اندازه کولو وړتیا ښودلې. په شنه کیمیا کې بایوسینسرونه او نانوکمپوزیتونه نه یوازې د کشف وړتیاوې لوړوي بلکې د دوامداره پراختیا اصولو سره سم د چاپیریال خطرونه هم کموي.
د شنه کیمیا اصول د میلامین د ټاکلو لپاره په مختلفو میتودونو کې پلي شوي دي. یوه طریقه د شنه خپریدونکي جامد مرحلې مایکرو استخراج میتود رامینځته کول دي چې د طبیعي قطبي پولیمر β-cyclodextrin سره د سیټریک اسید سره کراس لینک شوی وي ترڅو د ماشومانو فورمول او ګرمو اوبو په څیر نمونو څخه د میلامین 40 مؤثره استخراج لپاره وکارول شي. بله طریقه د شیدو نمونو کې د میلامین د ټاکلو لپاره د مانیچ عکس العمل کاروي. دا طریقه ارزانه، چاپیریال دوستانه، او د 0.1-2.5 ppm د خطي حد او د ټیټ کشف حد 41 سره خورا دقیقه ده. سربیره پردې، په مایع شیدو او ماشومانو فورمول کې د میلامین د کمیتي ټاکلو لپاره د لګښت مؤثره او چاپیریال دوستانه میتود د فویریر ټرانسفارم انفراریډ لیږد سپیکٹروسکوپي په کارولو سره رامینځته شوی چې په ترتیب سره د 1 ppm او 3.5 ppm لوړ دقت او کشف محدودیتونه لري 42. دا میتودونه د میلامین د ټاکلو لپاره د اغیزمنو او دوامداره میتودونو پراختیا لپاره د شنه کیمیا اصولو پلي کول ښیې.
ډیری مطالعاتو د میلامین کشف لپاره نوښتګر میتودونه وړاندیز کړي دي، لکه د جامد مرحلې استخراج او د لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي (HPLC) 43 کارول، او همدارنګه د ګړندي لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي (HPLC)، کوم چې پیچلي پری درملنې یا د ایون-پیر ریجنټونو ته اړتیا نلري، په دې توګه د کیمیاوي ضایعاتو مقدار کموي 44. دا میتودونه نه یوازې د لبنیاتو محصولاتو کې د میلامین د ټاکلو لپاره دقیقې پایلې وړاندې کوي، بلکې د شنه کیمیا اصولو سره هم مطابقت لري، د خطرناک کیمیاوي موادو کارول کموي او د تحلیلي پروسې ټولیز چاپیریالي اغیز کموي.
د مختلفو برانڈونو څلویښت نمونې په درې ګوني ډول ازمول شوي، او پایلې یې په جدول 2 کې وړاندې شوي دي. د ماشومانو د فارمول او د شیدو پوډر نمونو کې د میلامین کچه په ترتیب سره له 0.001 څخه تر 0.004 ملی ګرامه / کیلوګرام او له 0.001 څخه تر 0.095 ملی ګرامه / کیلوګرام پورې وه. د ماشومانو د فارمول د دریو عمر ګروپونو ترمنځ هیڅ د پام وړ بدلون نه دی لیدل شوی. سربیره پردې، د شیدو پوډر په 80٪ کې میلامین کشف شو، مګر د ماشومانو فورمولونو 65٪ د میلامین سره ککړ وو.
د صنعتي شیدو پوډر کې د میلامین مینځپانګه د ماشومانو فارمول په پرتله لوړه وه، او توپیر یې د پام وړ و (p <0.05) (شکل 2).
ترلاسه شوي پایلې د FDA لخوا ټاکل شوي حد څخه ښکته وې (د 1 او 2.5 ملی ګرامه / کیلوګرام څخه ښکته). سربیره پردې، پایلې د CAC (2010) او EU45,46 لخوا ټاکل شوي حدونو سره سم دي، د بیلګې په توګه اعظمي اجازه ورکړل شوی حد د ماشومانو فورمول لپاره 1 ملی ګرامه kg-1 او د لبنیاتو محصولاتو لپاره 2.5 ملی ګرامه kg-1 دی.
د غناتي او نورو لخوا د ۲۰۲۳ کال د یوې مطالعې له مخې، په ایران کې د بسته بند شیدو په مختلفو ډولونو کې د میلامین مینځپانګه له ۵۰.۷ څخه تر ۷۹۰ μg kg−۱ پورې وه. د دوی پایلې د FDA د جواز وړ حد څخه ښکته وې. زموږ پایلې د Shoder او نورو څخه ټیټې دي. ۴۸ او Rima او نورو څخه. ۴۹. Shoder او نورو (۲۰۱۰) وموندله چې د ELISA لخوا ټاکل شوي د شیدو پوډر کې د میلامین کچه (n=۴۹) له ۰.۵ څخه تر ۵.۵ ملی ګرامه/کیلو ګرامه پورې وه. ریما او نورو د فلوروسینس سپیکٹروفوټومیټري لخوا د شیدو پوډر کې د میلامین پاتې شوني تحلیل کړل او وموندله چې د شیدو پوډر کې د میلامین مینځپانګه ۰.۷۲–۵.۷۶ ملی ګرامه/کیلو ګرامه وه. په ۲۰۱۱ کې په کاناډا کې د مایع کروماتګرافي (LC/MS) په کارولو سره د ماشومانو په فورمول کې د میلامین کچه (n=۹۴) څارلو لپاره یوه څیړنه ترسره شوه. د میلامین غلظت د منلو وړ حد څخه ښکته وموندل شو (لومړنی معیار: ۰.۵ ملی ګرامه kg−۱). دا امکان نلري چې د میلامین جعلي کچه کشف شوې د پروټین مینځپانګې زیاتولو لپاره کارول شوې تاکتیک وي. په هرصورت، دا د سرې کارولو، د کانټینر مینځپانګو لیږدولو، یا ورته فکتورونو لخوا نشي تشریح کیدی. سربیره پردې، کاناډا ته وارد شوي د شیدو پوډر کې د میلامین سرچینه افشا نه شوه 50.
حسني او نورو په ۲۰۱۳ کال کې د ایران په بازار کې د شیدو پوډر او مایع شیدو کې د میلامین مینځپانګه اندازه کړه او ورته پایلې یې وموندلې. پایلو وښودله چې د شیدو پوډر او مایع شیدو د یو برانډ پرته، نور ټول نمونې د میلامین سره ککړې وې، چې کچه یې د شیدو پوډر کې له ۱.۵۰ څخه تر ۳۰.۳۲ μg g−۱ او په شیدو کې له ۰.۱۱ څخه تر ۱.۴۸ μg ml−۱ پورې وه. د پام وړ، په هیڅ یوه نمونه کې سیانوریک اسید ونه موندل شو، چې د مصرف کونکو لپاره د میلامین مسمومیت احتمال کموي. ۵۱ پخوانیو مطالعاتو د شیدو پوډر لرونکي چاکلیټ محصولاتو کې د میلامین غلظت ارزولی دی. شاوخوا ۹۴٪ وارد شوي نمونې او ۷۷٪ ایراني نمونو کې میلامین شامل وو. په وارد شوي نمونو کې د میلامین کچه له ۰.۰۳۲ څخه تر ۲.۶۹۲ ملی ګرامه/کیلو ګرامه پورې وه، پداسې حال کې چې په ایراني نمونو کې د میلامین کچه له ۰.۰۱۳ څخه تر ۲.۶۰۰ ملی ګرامه/کیلو ګرامه پورې وه. په ټولیز ډول، په 85٪ نمونو کې میلامین کشف شو، مګر یوازې یو ځانګړی برانډ د جواز وړ حد څخه پورته کچه درلوده. 44 ټټلمیر او نورو د شیدو پوډر کې د میلامین کچه د 0.00528 څخه تر 0.0122 ملی ګرامه / کیلوګرام پورې راپور ورکړه.
جدول ۳ د دریو عمر ګروپونو لپاره د خطر ارزونې پایلې لنډیز کوي. خطر په ټولو عمر ګروپونو کې له ۱ څخه کم و. په دې توګه، د ماشومانو په فورمول کې د میلامین څخه د غیر سرطاني روغتیا خطر شتون نلري.
د لبنیاتو په محصولاتو کې د ککړتیا ټیټه کچه ممکن د چمتووالي پرمهال د غیر ارادي ککړتیا له امله وي، پداسې حال کې چې لوړه کچه ممکن د قصدي اضافه کولو له امله وي. سربیره پردې، د ټیټ میلامین کچې سره د لبنیاتو محصولاتو مصرف کولو څخه د انسان روغتیا ته ټولیز خطر ټیټ ګڼل کیږي. دا پایله کیدی شي چې د میلامین دومره ټیټې کچې لرونکي محصولاتو مصرف د مصرف کونکي روغتیا ته هیڅ خطر نه رامینځته کوي 52.
د لبنیاتو په صنعت کې د خوړو د خوندیتوب مدیریت اهمیت ته په پام سره، په ځانګړې توګه د عامې روغتیا ساتنې په برخه کې، دا خورا مهمه ده چې د شیدو پوډر او د ماشومانو فورمول کې د میلامین کچه او پاتې شونو ارزولو او پرتله کولو لپاره یوه میتود رامینځته او تایید شي. د ماشومانو فورمول او د شیدو پوډر کې د میلامین ټاکلو لپاره یو ساده او دقیق HPLC-UV سپیکٹروفوټومیټریک میتود رامینځته شو. دا میتود د دې اعتبار او دقت ډاډمن کولو لپاره تایید شو. د میتود کشف او اندازه کولو محدودیتونه د ماشومانو فورمول او د شیدو پوډر کې د میلامین کچه اندازه کولو لپاره دومره حساس ښودل شوي. زموږ د معلوماتو له مخې، په ډیری ایراني نمونو کې میلامین کشف شو. د میلامین ټولې کشف شوې کچې د CAC لخوا ټاکل شوي اعظمي اجازه وړ حد څخه ښکته وې، چې دا په ګوته کوي چې د دې ډول لبنیاتو محصولاتو مصرف د انسان روغتیا ته خطر نه رامینځته کوي.
ټول کارول شوي کیمیاوي ریجنټونه د تحلیلي درجې وو: میلامین (2,4,6-triamino-1,3,5-triazine) 99٪ خالص (Sigma-Aldrich، St. Louis, MO)؛ HPLC-درجه ایزتونیټریل (Merck، Darmstadt، جرمني)؛ الټرا خالص اوبه (Millipore، Morfheim، فرانسه). د ضایع کیدو وړ سرنج فلټرونه (Chromafil Xtra PVDF-45/25، د سوریو اندازه 0.45 μm، د غشا قطر 25 ملي میتر) (Macherey-Nagel، Düren، جرمني).
د نمونو د چمتو کولو لپاره یو الټراسونک حمام (ایلما، جرمني)، یو سنټرفیوج (بیکمن کولټر، کرفیلډ، جرمني) او HPLC (KNAUER، جرمني) کارول شوي وو.
د لوړ فعالیت مایع کروماتګراف (KNAUER، جرمني) چې د UV کشف کونکي سره سمبال و، کارول شوی و. د HPLC تحلیل شرایط په لاندې ډول وو: د UHPLC الټیمیټ سیسټم چې د ODS-3 C18 تحلیلي کالم (4.6 ملي میتر × 250 ملي میتر، د ذراتو اندازه 5 μm) (MZ، جرمني) سره سمبال و. د HPLC ایلوینټ (ګرځنده مرحله) د TFA/میتانول مخلوط (450:50 ملی لیتر) و چې د جریان کچه یې 1 ملی لیتر دقیقه-1 وه. د کشف طول موج 242 nm و. د انجیکشن حجم 100 μL و، د ستون تودوخه 20 °C وه. څرنګه چې د درملو د ساتلو وخت اوږد دی (15 دقیقې)، نو راتلونکی انجیکشن باید د 25 دقیقو وروسته ترسره شي. میلامین د ساتلو وخت او د میلامین معیارونو د UV سپیکٹرم لوړوالی پرتله کولو سره پیژندل شوی و.
د میلامین یو معیاري محلول (۱۰ μg/mL) د اوبو په کارولو سره چمتو شو او په یخچال کې (۴ °C) د رڼا څخه لرې وساتل شو. د سټاک محلول د ګرځنده پړاو سره نرم کړئ او کاري معیاري محلولونه چمتو کړئ. هر معیاري محلول ۷ ځله HPLC ته داخل شو. د کیلیبریشن معادله ۱۰ د ټاکل شوي چوکۍ ساحې او ټاکل شوي غلظت د ریګریشن تحلیل لخوا محاسبه شوه.
په سوداګریزه توګه د غوا د شیدو پوډر (۲۰ نمونې) او د غوا د شیدو پر بنسټ د ماشومانو د فارمول د مختلفو برانڈونو نمونې (۲۰ نمونې) د ایران له سیمه ایزو سوپر مارکیټونو او درملتونونو څخه د مختلفو عمر ګروپونو (۰-۶ میاشتې، ۶-۱۲ میاشتې، او >۱۲ میاشتو) ماشومانو ته د تغذیې لپاره اخیستل شوي او د تحلیل پورې په یخچال شوي تودوخه (۴ °C) کې زیرمه شوي. بیا، د همجنس شوي شیدو پوډر ۱ ± ۰.۰۱ ګرامه وزن شو او د اسیټونایټریل: اوبو سره مخلوط شو (۵۰:۵۰، v/v؛ ۵ ملی لیتر). مخلوط د ۱ دقیقې لپاره وخوړل شو، بیا د ۳۰ دقیقو لپاره په الټراسونیک حمام کې سونیکیټ شو، او په پای کې د ۱ دقیقې لپاره وخوځول شو. بیا مخلوط د خونې په تودوخه کې د ۱۰ دقیقو لپاره په ۹۰۰۰ × g کې سینټرفیوج شو او سوپرنټینټ د ۲ ملی لیتر آټوسمپلر وایل کې د ۰.۴۵ μm سرنج فلټر په کارولو سره فلټر شو. فلټریټ (250 μl) بیا د اوبو (750 μl) سره مخلوط شو او د HPLC سیسټم ته داخل شو 10,42.
د دې طریقې د تایید لپاره، موږ د غوره شرایطو لاندې د بیا رغونې، دقت، د کشف حد (LOD)، د مقدار ټاکلو حد (LOQ)، او دقت مشخص کړ. LOD د نمونې مینځپانګې په توګه تعریف شوی و چې د لوړوالي لوړوالی یې د اساسی شور کچې څخه درې ځله لوړ وي. له بلې خوا، د نمونې مینځپانګه چې د لوړوالي لوړوالی یې د سیګنال څخه تر شور تناسب 10 ځله لوړوالی لري د LOQ په توګه تعریف شوی و.
د وسیلې غبرګون د اوو معلوماتو ټکو څخه جوړ شوي کیلیبریشن منحني په کارولو سره ټاکل شوی و. د میلامین مختلف مینځپانګې کارول شوي (0، 0.2، 0.3، 0.5، 0.8، 1 او 1.2). د میلامین محاسبې پروسې خطي والی ټاکل شوی و. سربیره پردې، د میلامین ډیری مختلفې کچې په خالي نمونو کې اضافه شوي. د کیلیبریشن منحني د ماشوم فورمول او پوډر شیدو نمونو او د هغې R2 = 0.9925 کې د معیاري میلامین محلول 0.1–1.2 μg mL−1 په دوامداره توګه انجیکشن کولو سره جوړ شوی و. دقت د پروسې د تکرار او تکثیر وړتیا لخوا ارزول شوی و او په لومړیو او دریو راتلونکو ورځو کې د نمونو انجیکشن کولو سره ترلاسه شوی و (په درې ځله کې). د میتود تکرار وړتیا د اضافه شوي میلامین د دریو مختلف غلظت لپاره د RSD٪ محاسبه کولو سره ارزول شوې وه. د دقت ټاکلو لپاره د بیا رغونې مطالعات ترسره شوي. د استخراج د طریقې له مخې د رغیدو کچه د ماشومانو د فارمول او وچو شیدو په نمونو کې د میلامین غلظت په دریو کچو (0.1، 1.2، 2) محاسبه شوې 9،11،15.
د اټکل شوي ورځني مصرف (EDI) د لاندې فورمول په کارولو سره ټاکل شوی: EDI = Ci × Cc/BW.
چیرته چې Ci د میلامین اوسط مقدار دی، Cc د شیدو مصرف دی او BW د ماشومانو اوسط وزن دی.
د معلوماتو تحلیل د SPSS 24 په کارولو سره ترسره شو. د کولموګوروف-سمیرنوف ازموینې په کارولو سره نورمالیت ازمول شوی و؛ ټول معلومات غیر پیرامیټریک ازموینې وې (p = 0). له همدې امله، د کرسکل-والیس ازموینه او د مان-ویټني ازموینه د ډلو ترمنځ د پام وړ توپیرونو د ټاکلو لپاره کارول شوې وه.
انګلفینګر، جونیر. میلامین او د نړیوال خوراکي ککړتیا باندې د هغې اغیز. د طب د نیو انګلینډ ژورنال 359(26)، 2745–2748 (2008).
لینچ، آر ای، او نور. د ماشومانو په کاسو کې د میلامین مهاجرت باندې د pH اغیز. د خوړو د ککړتیا نړیواله ژورنال، 2، 1-8 (2015).
بیرټ، ایم پي او ګیلبرټ، آی ایچ د ټریپانوزومونو داخلي برخې ته د زهرجن مرکباتو په نښه کول. په پرازیتولوژي کې پرمختګ 63، 125-183 (2006).
نرمان، ایم ایف، او نور. د درملو رسولو وسایطو په توګه د میلامین ډینډریمرونو په ویټرو او ان ویوو ارزونه. د فارمسي نړیواله ژورنال، 281(1–2)، 129–132(2004).
د روغتیا نړیوال سازمان. د میلامین او سیانوریک اسید د زهرجنو اړخونو بیاکتنې لپاره د متخصصینو غونډې ۱-۴ (۲۰۰۸).
هاو، اې کې-سي، کوان، ټي اېچ او لي، پي کې-ټي. د میلامین زهریت او پښتورګي. د امریکا د نیفرولوژي ټولنې ژورنال 20(2)، 245–250 (2009).
اوزترک، ایس او ډیمیر، این. د لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي (HPLC) لخوا د لبنیاتو محصولاتو کې د میلامین پیژندلو لپاره د یو نوي IMAC جذبونکي پراختیا. د خوړو ترکیب او تحلیل ژورنال 100، 103931 (2021).
چانسوورن، وي.، پانیک، ایس. او ایمیم، اې. د مانیچ شنه تعامل پر بنسټ په مایع شیدو کې د میلامین ساده سپیکٹروفوټومیټریک ټاکل. سپیکٹروکیم. اکټا برخه A مول. بایمول. سپیکٹروسک. ۱۱۳، ۱۵۴-۱۵۸ (۲۰۱۳).
ډیبس، ایم. او الحبیب، آر. د HPLC/ډایډ اری کروماتګرافي لخوا د ماشومانو په فورمول، د شیدو پوډر او د پانګاسیوس نمونو کې د میلامین ټاکل. د چاپیریال تحلیلي توکسیولوژي ژورنال، 2(137)، 2161–0525.1000137 (2012).
سکینر، کی جي، توماس، جي ډي، او اوسټرلو، جي ډي میلامین زهریت. د طبي زهریت ژورنال، 6، 50-55 (2010).
د روغتیا نړیوال سازمان (WHO)، د میلامین او سیانوریک اسید زهر او روغتیا اړخونه: د روغتیا کاناډا، اوټاوا، کاناډا لخوا ملاتړ شوي د WHO/FAO د همکارۍ متخصصینو غونډې راپور، د دسمبر 1-4 2008 (2009).
کورما، SA، او نور. د لیپید جوړښت او د ماشوم فارمول پوډر کیفیت پرتله کولو مطالعه چې نوي فعال ساختماني لیپیدونه او سوداګریز ماشوم فارمول لري. د اروپا د خوړو څیړنه او ټیکنالوژي 246، 2569-2586 (2020).
الواصف، ایم. او هاشم، ایچ. د پام د تیلو په کارولو سره د ماشومانو د فورمول د تغذیې ارزښت، د کیفیت ځانګړتیاوې او د شیلف ژوند لوړول. د کرنې څیړنې منځني ختیځ ژورنال 6، 274-281 (2017).
ین، ډبلیو، او نور. د میلامین په وړاندې د مونوکلونل انټي باډیز تولید او په خامو شیدو، وچو شیدو، او د څارویو په خوړو کې د میلامین کشفولو لپاره د غیر مستقیم سیالي کونکي ELISA میتود پراختیا. د کرنې او خوړو کیمیا ژورنال 58(14)، 8152–8157 (2010).